第二节《 基因工程的原理和技术》word教案 浙科版生物选修3
2)要选择强启动子或组织特异性启动子。启动子有强有弱,选择强启动子可以增加转录活性,使基因产物量增多。如果希望基因在生物的某个组织表达,如只在植物种子中表达,就要选择种子中特异表达的启动子。
三、将目的基因导入受体细胞
(提出问题)1、不同的受体细胞导入方法相同吗?2、导入是否意味着转化?
(学生活动)学生思考讨论。
(总结归纳)
转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
① 导入植物细胞:农杆菌转化法(表达载体导入农杆菌,再让农杆菌感染植物细胞)
将目的基因导入受体细胞: 细菌
↓氯化钙
细胞壁的通透性增大
↓
重组质粒进入受体细胞
↓
目的基因随受体细胞的繁殖而复制
②导入动物细胞:显微注射法(将基因表达载体提纯,用显微仪注射到受精卵中)
③导入微生物细胞:Ca2+处理受体细胞成为感受态细胞,再进行混合。
提示:农杆菌转化法的原理是利用农杆菌(胞内寄生菌)对植物的感染而把目的基因导入受体细胞。
四.筛选含有目的基因的受体细胞
(提出问题)1、筛选的目的是什么?2、筛选方法有哪些?
(学生活动)学生思考讨论。
(总结归纳)
筛选是为了确定重组DNA是否导入受体细胞。筛选的方法有两种。
①检测是否插入目的基因,利用DNA分子杂交技术,目的基因DNA一条链(作探针)与受体细胞中提取的DNA杂交,看是否有杂交带。
②检测是否转录出了mRNA,利用DNA分子杂交技术,目的基因DNA一条链(作探针)与受体细胞中提取的mRNA杂交,看是否有杂交带。
五、目的基因的表达
通过鉴定表达的蛋白产物或性状来确定目的基因是否表达。
①检测目的基因是否翻译成蛋白质。抗体与蛋白质进行抗原-抗体杂交,看是否有杂交带。
②还可以进行个体水平的鉴定,根据其性状。
提示:①DNA分子杂交技术首先提取受体细胞中的DNA,然后高温解成单链,再与同位素标记的DNA探针杂交;②抗原-抗体杂交所用到的抗体是用表达出的蛋白质注射动物进行免疫,产生相应的抗体,并提取出而来的。
3)要有选择标记基因,如抗生素基因,以便选择出真正的转基因生物。
【板书设计】
1.2 基因工程的基本操作程序
一、目的基因的获取
二、形成重组DNA分子
(基因工程的核心)
三、将目的基因导入受体细胞
四、筛选含有目的基因的受体细胞
五、目的基因的表达
【随堂练习】
1.基因工程常用的受体细胞有( )
①大肠杆菌 ②枯草杆菌 ③支原体 ④动植物细胞
A.①②③④ B.①②③ C.②③④ D.①②④
2.基因工程的操作步骤:①使目的基因与运载体相结合,②将目的基因导入受体细胞,③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求,④提取目的基因,正确的操作顺序是( )
A.③②④① B.②④①③ C.④①②③ D.③④①②
【布置作业】完成学案和作业本上内容。
【教学反思】因为基因工程对学生来说是比较抽象的,所以首先设置问题情景,利用生活中的的问题激发学生的学习兴趣,使学生在思索中学习新知识。在教学中要注意让抽象的语言在直观的插图中找到注释,在实际动手中形成正确的认识。还要引导学生从基因工程的整体思考问题,解决问题。
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三、将目的基因导入受体细胞
(提出问题)1、不同的受体细胞导入方法相同吗?2、导入是否意味着转化?
(学生活动)学生思考讨论。
(总结归纳)
转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
① 导入植物细胞:农杆菌转化法(表达载体导入农杆菌,再让农杆菌感染植物细胞)
将目的基因导入受体细胞: 细菌
↓氯化钙
细胞壁的通透性增大
↓
重组质粒进入受体细胞
↓
目的基因随受体细胞的繁殖而复制
②导入动物细胞:显微注射法(将基因表达载体提纯,用显微仪注射到受精卵中)
③导入微生物细胞:Ca2+处理受体细胞成为感受态细胞,再进行混合。
提示:农杆菌转化法的原理是利用农杆菌(胞内寄生菌)对植物的感染而把目的基因导入受体细胞。
四.筛选含有目的基因的受体细胞
(提出问题)1、筛选的目的是什么?2、筛选方法有哪些?
(学生活动)学生思考讨论。
(总结归纳)
筛选是为了确定重组DNA是否导入受体细胞。筛选的方法有两种。
①检测是否插入目的基因,利用DNA分子杂交技术,目的基因DNA一条链(作探针)与受体细胞中提取的DNA杂交,看是否有杂交带。
②检测是否转录出了mRNA,利用DNA分子杂交技术,目的基因DNA一条链(作探针)与受体细胞中提取的mRNA杂交,看是否有杂交带。
五、目的基因的表达
通过鉴定表达的蛋白产物或性状来确定目的基因是否表达。
①检测目的基因是否翻译成蛋白质。抗体与蛋白质进行抗原-抗体杂交,看是否有杂交带。
②还可以进行个体水平的鉴定,根据其性状。
提示:①DNA分子杂交技术首先提取受体细胞中的DNA,然后高温解成单链,再与同位素标记的DNA探针杂交;②抗原-抗体杂交所用到的抗体是用表达出的蛋白质注射动物进行免疫,产生相应的抗体,并提取出而来的。
3)要有选择标记基因,如抗生素基因,以便选择出真正的转基因生物。
【板书设计】
1.2 基因工程的基本操作程序
一、目的基因的获取
二、形成重组DNA分子
(基因工程的核心)
三、将目的基因导入受体细胞
四、筛选含有目的基因的受体细胞
五、目的基因的表达
【随堂练习】
1.基因工程常用的受体细胞有( )
①大肠杆菌 ②枯草杆菌 ③支原体 ④动植物细胞
A.①②③④ B.①②③ C.②③④ D.①②④
2.基因工程的操作步骤:①使目的基因与运载体相结合,②将目的基因导入受体细胞,③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求,④提取目的基因,正确的操作顺序是( )
A.③②④① B.②④①③ C.④①②③ D.③④①②
【布置作业】完成学案和作业本上内容。
【教学反思】因为基因工程对学生来说是比较抽象的,所以首先设置问题情景,利用生活中的的问题激发学生的学习兴趣,使学生在思索中学习新知识。在教学中要注意让抽象的语言在直观的插图中找到注释,在实际动手中形成正确的认识。还要引导学生从基因工程的整体思考问题,解决问题。
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