对生物实验试剂层析液配方改进的探索与思考 高中生物论文.doc

傅萍萍  

摘  要   关注人的发展是新课程的核心理念，这一理念要求生物实验员在实验室管理与教学中，既要掌握生物实验的基本操作技能，提高学生的实验能力，发展学生的智力，更要关心学生的身体健康，避免实验药品的危害。苯是一种毒性很强的有机物，美国早在1992年就停止苯在学生实验中的使用。在《光合色素的提取和分离》实验中，笔者根据学校现有的条件，经过课余多次实验试验，发现用低毒性的甲苯代替苯对层析液的配方进行改进，不但可以减轻药品苯对师生身体的危害，还可以使四条色素带分离更明显。因此，笔者建议用甲苯替代苯配制层析液，使实验更安全、环保，使实验效果更好。

关键词   苯  甲苯  层析液  色素分离 

 一、课题的提出

 生物学是一门以实验和观察为主的学科。生物实验教学在激发学生的学习兴趣、培养学习动机、巩固知识、开发智力和创新思维、形成实事求是的科学态度以及协作精神等方面起着重要的作用，是实施素质教育的最有效形式。生物课程标准明确提出：生物教学要加强实验和其他实践活动的教学，加强对学生观察能力、实验能力、思维能力和自学能力等能力的培养；要关注教学资源的开发，如利用替代物品、药剂、仪器等，争取创造性地增加低成本的实验和其他实践活动，消除生物实验的安全隐患，促进学生的健康成长与发展。作为一名已有20多年实验工作经验的实验员，深知学生才是教学过程的起点和终点，是教育的本体，关注人的发展是新课程的核心理念；深知自己唯有高度重视实验教学，积极投身于新课程改革的大环境中，坚持以“管理育人，服务育人”的理念，时刻为学生的终身发展服务，为提高学生的生物科学素养着想，才能应对现代社会和教育发展对实验教师的需要。

    然而生物实验中有不少药品具有一定的刺激性、腐蚀性和毒性，如氢氧化钠溶液呈强碱性，对人体健康具有负面影响，使用时务必小心，最好能戴上手套；过氧化氢具有强腐蚀性，对身体有害，经人体皮肤吸收可造成伤害，最好戴好手套和护目镜；丙酮、二苯胺具有一定的毒性，使用后务必洗手，等等。从学生的健康着想，笔者以为在生物实验中一方面要培养学生的卫生与健康意识，培养学生良好的生活卫生习惯，另一方面教师更应探索用低毒性或无毒性的药品代替毒性较强的药品，以减轻药品对学生身体的危害，使实验更安全、环保，这也是每一位教师义不容辞的职责与任务。

    高中生物《光合色素的提取和分离》实验中，由于层析液的成份苯对师生的健康危害较大，因此从学生、老师的身体安全考虑，多年来笔者一直在苦苦探索一种无毒性或低毒性的药品来替换它。经过课余时间多次的实验试验，笔者发现用低毒性的甲苯代替苯对层析液的配方进行改进，不但可以减轻药品苯对师生身体的危害，还可以使四条色素带分离更明显。为此笔者提出了用低毒性的甲苯代替苯对层析液配方进行改进的建议。下面就此问题谈谈自己的实践探索与思考，以供同行参考。

     二、课题研究的理论依据

1. 苯在“光合色素的提取和分离”中的作用

光合色素在光合作用中起着吸收、传递与转化光能的作用，为了能让学生更深地理解叶绿体中色素的作用，叶绿体中色素的种类与颜色，高中生物新课程仍安排了“光合色素的提取和分离”实验。其实早在 1954年，生物化学家阿诺恩从菠菜叶细胞中获得十分完整而且能够把全部光合反应进行到底的叶绿素。绝大多数植物叶绿体中含有胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。其中叶绿素a存在于所有放氧生物中，叶绿素b存在于高等植物和绿藻中。

在高中生物实验中，《光合色素的提取和分离》实验一直占有很重要的地位。实验要求将绿叶中的各种色素提取出来，并用纸层析法把各种色素在滤条上分离开，形成一条条不同色素相对应的色带。实验的基本原理是：

（1）绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂丙酮、乙醇中，因此，可以用丙酮、乙醇来提取绿叶中的色素。

    （2）绿叶中的色素都能溶解在层析液中，不同的色素在层析液中的溶解度不同，溶解度高的色素随层析液在滤纸上扩散得快，反之则慢。所以，几分钟之后，绿叶中的色素就会随着层析液在滤纸上的扩散而分离开。由于苯是一种良好的有机溶剂，而且性质相对比较稳定。因此，苯一直以来被作为该实验的层析液材料。这种层析液的配置方法为：20份石油醚、2份丙酮、1份苯。

2.用甲苯代替苯对层析液配方进行改进的依据

众所周知，苯是一种毒性大、渗透性较强、易挥发的有机物。它可以通过皮肤、呼吸道进入人体，而且难以排泄。短时间内吸入高浓度苯蒸气可造成急性中毒，产生头痛、头晕、咳嗽、胸闷、兴奋、步态蹒跚、神志模糊、血压下降、肌肉震颤、呼吸浅快、脉搏快而弱等现象。

早在1982年，医学家首次发表了苯与白血病有关的研究报告。此后，许多国家相继报道了由于接触苯而发生再障淋巴瘤和白血病等造血系统的病例。无论是流行病学调查还是实验室研究，都证明大量接触苯与白血病有因果关系。世界卫生组织下属国际癌症研究机构（IARC）1993年对苯的致癌性评级为：一类人类致癌物。其主要有以下四个方面：

1、直接致癌机制；

2、破坏骨髓微循环，导致造血干细胞分化和成熟迟缓，乃至凋亡；

3、产生大量自由基并形成损伤；

4、动物实验表明，苯代谢可与细胞中的DNA结合，在组织中形成DNA化合物，并抑制DNA和RNA合成。

2007年10月，有机化学博士、现任美国3M公司产品部门代表张亦帆先生来母校参观实验室时，也严肃地指出：苯是一种毒性很强的有机物，美国早在1992年就禁止在学生实验中使用苯。再说目前一般农村高中生物实验室的通风设备还比较差，除了开门窗通风换气以外，几乎没有其他通风设备。尽管在层析液中苯的含量较少，但几十个组合在一起，加上学生在操作中不小心打翻，清洗时残液的挥发，整个实验室还是充满了苯蒸气。苯主要是以蒸气形态经呼吸道进入人体，这给学生、老师的身体健康带来很大的危害。07学年实施的《普通高中生物课程标准（生物）》对该实验的安全性也有所提高，已将溶解色素用的丙酮改为乙醇，但层析分离时所用的层析液仍采用毒性很强的苯进行配制。

本人在二十多年的生物实验工作经历中也发现，该层析液对学生和老师的健康危害较大，经常会有头疼、恶心现象发生，其首当其冲的就是苯。而甲苯属低毒，进入人体后，可以在人体的NADP（转酶Ⅱ）存在下被氧化成苯甲醇，再在NAD（转酶Ⅰ）存在下氧化为苯甲醛，生成甲基苯甲酸，然后与甘氨酸结合形成甲基马尿酸，在18小时内几乎全部排出体外。即使是吸入后残留在肺部的少量的甲苯，也在接触后3小时内（半衰期为0.5—1小时）全部呼出体外。实验中残留的甲苯，在清洗时进入水体，由于甲苯在水溶液中挥发的较快，其在地表水中，不是持久性的污染物，挥发到空气中的甲苯也能被光解。因此，无论是安全方面，还是环保方面，该实验中使用甲苯都比使用苯更加合适。为学生、老师的身体健康考虑，根据学校现有的条件，笔者通过多次实验探索，发现用低毒的甲苯取代苯来完成“光合色素的提取和分离”实验能够得到更好的效果。

三、用甲苯代替苯对层析液配方进行改进的探索

1.实验步骤

笔者在每次试验中，为确保实验结果的可行可信，都统一采用了新鲜的菠菜叶作为提取色素的材料，用95％乙醇作溶解色素的溶剂，将20份石油醚（60—90℃下分馏）、2份丙酮、1份甲苯配制成层析液；每次试验都采用对比实验；每次对比实验都采用同一磨制、过滤的色素溶解液与同时用苯和甲苯配制的不同的层析液进行实验，得到了非常理想的实验效果。具体操作过程如下：

⑴ 将剪成一厘米宽十厘米长的滤纸条放干燥箱进行干燥处理。

⑵ 分别用一份苯和甲苯与二份丙酮、二十份石油醚配制成两种不同的层析液。

⑶ 在研钵中放入5克剪碎的新鲜的菠菜叶子、0.5克碳酸钙、0.5克二氧化硅，先将其快速研磨成浆状，再放入12毫升95％乙醇快速研磨使其混合均匀，静置十几秒钟。

……………………………【全文请点击下载word压缩文档】
点击下载此文件