2010高考生物冲刺必备（选修3）（一）【高考生物】

考点梳理

（一）DNA重组技术的基本工具

1．限制性核酸内切酶——“分子手术刀”

（1）主要是从原核生物中分离纯化来的。

（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并能将每一条链上特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键切开。

（3）切割方式：①在中心轴线两侧将DNA切开，切口是黏性末端。②沿着中心轴线切开DNA，切口是平末端。

2．DNA连接酶——“分子缝合针”

（1）DNA连接酶的分类：E.coliDNA连接酶和T₄DNA连接酶。

（2）作用及作用部位：E.coliDNA连接酶作用于黏性末端被切开的磷酸二酯键，T₄DNA连接酶作用于黏性末端和平末端被切开的磷酸二酯键。

3．运载体（运输工具）：质粒 、噬菌体和动、植物病毒等

（1）必备的条件：

① 能在受体细胞中复制并稳定保存；

② 具有一至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入；

③ 具有标记基因，供重组 DNA的鉴定和选择；

④ 对受体细胞无害，不会影响受体细胞正常的生命活动。

（2）常用运载体——质粒：裸露的，结构简单且独立于细菌DNA之外的，具有自我复制能力的小型环状DNA分子。

(二) 基因工程的基本操作程序

1．目的基因的获取：

① 直接从生物体中提取总DNA，构建基因组DNA文库，从中调用目的基因；

② 以mRNA为模板，反转录合成互补的DNA片段，建立cDNA文库；

③ 利用聚合酶链式反应（PCR）特异性地扩增所需要的目的基因片段；

④ 化学合成。………………………………点击下载浏览全部点击下载此文件