基础实验 湖南地区高三生物一轮复习教案
【DNA的粗提取与鉴定】
实验原理:
DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl溶液浓度的变化而改变的。当NaCl溶液浓度为 时,DNA的溶解度最低。
DNA不溶于 溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶解。
DNA遇二苯胺试剂会染成 色。
方法步骤:
1.制备鸡血细胞液:0.1g/mL 溶液(抗凝剂)100mL 注入活鸡血
180mL 离心或 沉淀 收集 。
2.提取鸡血细胞的核物质:取鸡血细胞液5-10mL 加入20mL蒸馏水(目的是 ) 玻璃棒沿一个方向 搅拌5min(目的是
) 用 过滤 收集 。
3.溶解细胞核内的DNA:将 溶液40mL加入到滤液中 玻璃棒沿 搅拌1min。
4.析出含DNA的黏稠物:沿烧杯内壁缓缓加入 (作用是
),同时玻璃棒沿一个方向 搅拌 溶液中出现丝状物 当 时 停止加水(此时,溶液中的NaCl浓度相当于 )。
5.滤取含DNA的粘稠物:用 层纱布过滤 含DNA的粘稠物留在 。
6.将DNA的粘稠物再溶解:将DNA的粘稠物加入到20mL 溶液中 搅
拌3 min。
7.过滤含有DNA的NaCl溶液:用2层纱布过滤 收集 。
8.提取含杂质较少的DNA:向上述滤液中加入 的、体积分数为 的 溶液50mL,并缓慢搅拌 溶液中出现丝状物,其主要成分为 。
9.DNA的鉴定:向1、2号两支试管各加入 溶液5mL 1号试管
中加入 ,搅拌使之溶解 向1、2号两支试管各加入4mL 试剂
加热5min 冷却,比较1、2号试管中的颜色变化。(1号试管中溶液呈 色)
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