细胞工程同步学习指导（二） 高考备考

[知识拓展]
四、动物细胞培养
(一)动物细胞培养
1、问题：
(1)培养的动物细胞为什么大多取自动物胚胎或幼龄动物?
答案：分裂能力强。

(2)为什么将组织取出后，要用胰蛋白酶处理分散成单个细胞?
答案：因为动物细胞培养时要制成悬浮液，若不用胰蛋白酶处理，就会成为大小不一的组织块，则不易成为悬浮液，进行动物细胞培养。

(3)细胞株和细胞系的区别


培养细胞大多取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，将组织取出后先用胰蛋白酶等使组织分散成单个细胞，然后配成一定浓度的细胞悬浮液，将该 悬浮液放入培养瓶中，在培养箱中培养，这个过程称为原代培养。细胞在培养瓶中贴壁培养，随着细胞的生长和增殖，细胞数量增多，需要定期地用胰蛋白酶使细胞 从壁上脱离下来，配置成细胞悬浮液，分装到两个或两个以上的培养瓶中培养，这称为传代培养。

2、动物细胞培养技术的应用
（1）用于制造有重要价值的蛋白质生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。
（2）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。
（3）用于检测有毒物质。
（4）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据。

3、植物细胞和动物细胞培养的比较

　　（二）动物细胞融合

　　1、

　　2、动物细胞融合技术的意义。用这种体细胞融合的技术，如今已在动物间实现了小鼠和田鼠，小鼠和小鸡，甚至于小鼠和人等许多远缘和超远缘的体细胞杂 交。虽然目前动物的杂交细胞还只停留在分裂传代的水平，不能分化发育成完整的个体，但在理论研究和基因定位上都有重大意义。最重要的意义是单克隆抗体。

　　3、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较

　　（三）单克隆抗体

　　1、提出问题：指通过克隆，形成遗传物质完全相同的细胞群，这样的细胞群有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体，即单克隆抗体。该技术源于人们为 了获得某种抗体，采用把相应抗原反复注射到动物体内然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。从动物血清中分离抗体的方法产量低、特异性差、纯度低、反应不 够灵敏。

　　2、设计方案：由于每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，利用单个B淋巴细胞进行无性繁殖，就可以产生单克隆抗体。由于B淋巴细胞不能无限增殖，因 此利用小鼠骨髓瘤细胞与之融合，就可达到目的。

　　3、实验步骤

　　·①将某抗原注入小鼠体内，从其脾脏获得产生相应抗体的B淋巴细胞

　　·②用灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合

　　·③在选择性培养基中筛选杂交瘤细胞

　　·④从杂交瘤细胞中挑选产生某种抗体的细胞群，进行规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖。

　　·⑤这样，从细胞培养液或小鼠腹水中提取大量的单克隆抗体。

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